Service de Microscopie et biologie cellulaire -MiCell

Le service d’imagerie photonique de l’IBGC (IPimS) a pour but de fournir à la communauté scientifique de l’IBGC un grand nombre de méthodologies de biologie cellulaire et d’imagerie pour suivre l’activité des cellules vivantes à un rythme spatial et temporel élevé.


Description

La mission de MiCell est de :

– conseiller et guider les chercheurs sur les meilleures méthodologies d’imagerie cellulaire pour répondre à leurs problématiques scientifiques.
– fournir des cours de formation, des instructions individuelles et des conseils sur les techniques de microscopie optique de base et avancées
– développer de nouvelles méthodologies technologiques pour répondre à des questions plus spécifiques
– soutenir la recherche tout en donnant aux chercheurs l’accès aux technologies les plus avancées dans le domaine de l’imagerie cellulaire et aux données d’imagerie d’analyse et de traitement développées dans l’installation d’imagerie voisine du BIC.

Microscopes disponibles à l’IBGC

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Leica DMRXA
Objectives 20x, 63x (oil), 100x (oil)
Filters: DAPI, GFP, CY3, TxRed, CFP, CY5
Applications: Immunofluorescence, déconvolution

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Leica DMLB
Objectives 5x (air) NA 0.15, 20x (air) NA 0.5, 100x (oil) NA 1.3
Filters: DAPI, GFP, CY3
Camera: Colorview II (Soft Imaging Sytem)
Applications: Immunofluorescence, white light

eq-photonique3
Zeiss Axioskop 2 plus
Objectives 63x (oil) NA 1.4, 100x (oil) NA 1.4
Filtres: DAPI, GFP, TxRed, GFP LP, CY5
Camera: AxioCamMRm (Zeiss), AxioVision software
Applications: Immunofluorescence, lumière blanche

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Olympus IX81
Objectives 20 x (sec) NA 0.45, 40x (sec) NA 0.6, 40x (oil) NA 1.3, 60x(oil) NA 1.45, 100x (oil) NA 1.4
Filters: DAPI, CFP, YFP, GFP, DsRed, mCherry, GFP LP, CY5
Camera: Hamamatsu Orca R2, pixel 6.45µm x 6;45µm, 1344 x 1024
Illumination: Olympus MT20
Laser 405 nm
Thermostatic chamber and CO2 controler: Solent Scientific
Software: Olympus Cell R
Applications: Videomicroscopie, Immunofluorescence, lumière blanche, déconvolution, photoactivation

Application illustrations

Immunofluorescence and déconvolution

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MDCK cell labelled with: alpha-tubulin (green) molecular motor dynein (red)
Image taken on the Zeiss Axioskop II microscope

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Images taken on the Olympus IX81 showing mitochondria in HeLa cells before (left) and after (right) deconvolution.
Images courtesy of Dr. M. Rojo.

BaLM superresolution microscopy (IBGC)

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STED superresolution confocal microscopy (BIC)

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Fission yeast imaged in confocal (top) or STED (bottom). Green is tubulin, red is nuclear pores cyan is SPB.
Images courtesy of Dr. I. Sagot.

GSDIM/d-STORM superresolution microscopy (BIC)

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COS-7 cell were labelled with alpha-tubulin and image in TIRFM (left panel and right top panel) or d-STORM superresolution microscopy (right bottom panel).
Images courtesy of Dr. S. Lécart (CPBM).

PALM superresolution microscopy (BIC)

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Arabidopsis thaliana expressing MBP-MAP4-mEos2 imaged with TIRFM (left) or superresolution PALM microscopy (right).